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文献解读| 负载I型胶原蛋白脂质体的制备、表征及体外皮肤渗透性评价
发布:2024-10-29 来源:胶原蛋白知识课堂 浏览:660


2024.10.29

负载I型胶原蛋白脂质体的制备、

表征及体外皮肤渗透性评价

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NEWS

为什么爱丁娜选择使用脂质体技术包裹I型胶原蛋白应用到化妆品中?2023年发表的这篇论文提供了详细的解析。

01

科普

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(1)、什么是I型胶原蛋白

I型胶原蛋白的相对分子质量约为 300 kDa,主要存在于皮肤、肺、骨骼和结缔组织中。I型胶原蛋白是一种三股螺旋结构的蛋白质,由两条 α1肽链和一条 α2肽链缠绕形成,每条肽链由(Gly-XY)n组成,其中X和Y主要代表脯氨酸和羟脯氨酸。其低免疫原性、良好的生物相容性和生物降解性等多种特性,I型胶原蛋白在生物产业中具有广泛的应用,如组织再生、药物、食品和化妆品。

(2)、什么是脂质体包裹技术

脂质体是由磷脂双分子层组成的封闭囊泡(通常直径为50–500 nm),广泛用于将 DNA、疫苗和药物等多种成分递送至体内,在药物和化妆品领域发挥了重要作用。负载鱼源肽的脂质体能改善抗氧化性能和皮肤渗透特性。

(3)、什么是胶原蛋白脂质体

是将胶原蛋白包载于脂质体内水相,粒径在100 nm左右,不仅提高了I型胶原蛋白的溶解性,还在一定程度上改善了皮肤的渗透性。爱丁娜的护肤品系列,使用国家首创专利技术-【一种决明子复方胶原脂质体及其应用】,实现大分子功效护肤品经涂抹使用后可自主吸收。


02

为什么使用该项技术应用到化妆品当中

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   论文首先从I型胶原蛋白优势进行介绍,相对分子质量约为300 kDa,具有完整的三股螺旋结构的蛋白质,由于其低免疫原性、良好的生物相容性和生物降解性等多种特性,在生物产业中具有广泛的应用;尽管|型胶原蛋白具有许多优点,但低生物利用度和低吸收效率仍然限制了其应用;爱丁娜针对这一挑战,发现使用脂质体包封胶原蛋白可以提高其生物利用度和吸收效率,解决了这一难题,将大分子包裹在脂质体内,良好的改善了抗氧化性能和皮肤渗透特性,与单纯的使用I型胶原蛋白涂抹皮肤相比,负载胶原蛋白的脂质体更容易穿透皮肤,直达肌底。

03

胶原蛋白脂质体的完整性

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图1胶原蛋白及其脂质体的 SDS-PAGE 电泳图(M-蛋白 Marker;1-未破膜的空白脂质体,2-破膜后的空白脂质体,3-超纯水+Triton X-100;4、5-破膜后的胶原蛋白脂质体,6-未破膜的胶原蛋白脂质体,7-胶原蛋白溶液)。

   通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定了胶原蛋白脂质体的结构完整性。在制备过程中未观察到蛋白质的结构或构象不稳定性,并且蛋白质从脂质体中释放出来。无论膜是否破裂,空白脂质体均无条带,而胶原蛋白包被的脂质体在膜未破裂时有浅条带,因为并非所有胶原蛋白都被覆盖。破膜的胶原蛋白脂质体条带与胶原蛋白溶液的条带之间没有显著差异,也没有其他明显的条带,表明脂质体覆盖的胶原蛋白是完整的。此外,破膜的胶原蛋白脂质体条带的深度比胶原蛋白溶液的浅,这与包封率测量中的结果一致。

04

使用脂质体包裹后的细胞毒性检测

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图2胶原脂质体对BV2细胞活力的影响

   为了测试胶原蛋白脂质体的生物安全性,我们使用BV2 细胞进行细胞活力测试。结果显示了胶原蛋白脂质体对 BV2 细胞存活率的影响,表明不同浓度的胶原蛋白脂质体导致BV2 细胞存活率均大于 95%,且细胞存活率之间无显著差异。这些结果表明,制备的胶原蛋白脂质体在生物学上是安全的,实验结果为胶原蛋白脂质体在化妆品和制药领域作为天然安全原料的应用提供了一定的参考。

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胶原蛋白和胶原蛋白脂质体的渗透性

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图 3不同温度下胶原蛋白及其脂质体的累积透过曲线;(a)舌解鱼皮肤;(b) 裸鼠皮肤;(C) BALB/c 小鼠正常皮肤;(d) BALB/c 小鼠损伤皮肤。

    图中显示了胶原蛋白和胶原蛋白脂质体在不同动物皮肤中24 小时内的累积渗透量 (以每平方厘米表示)。在相同温度 (32℃)下,BALB/c 小鼠正常皮肤组、BALB/c 小鼠损伤皮肤组和舌岛鱼皮肤组中胶原蛋白脂质体的累积渗透量分别是胶原蛋白溶液的1.3、1.5 和1.2倍。测试表明,在相同温度下负载胶原蛋白的脂质体比胶原蛋白本身更容易穿透皮肤。

06

总结

    胶原蛋白在pH=8 时溶解度最低,这是胶原蛋白的等电点。在上述结果的指导下.首次制备了牛|型胶原蛋白纳米脂质体。观察表明:

① 胶原蛋白脂质体呈球形,具有平均直径和高稳定性。物理稳定性研空表明,低温(4℃)延长了胶原蛋白脂质体的储存时间,SDS-PAGE 分析表明胶原蛋白完全包封在脂质体中。

② MTT(细胞毒性检测)测定表明胶原蛋白脂质体在生物学上是安全的。

③ 渗透性研究表明,与胶原蛋白本身相比,负载胶原蛋白的脂质体更容易穿透皮肤,并且它们增加了皮肤中胶原蛋白的滞留量,从而延缓胶原蛋白的释放。

④ 通过脂质体包封胶原蛋白以提高其生物利用度和吸收效率的可行性,从而为研空由于水溶性差和皮肤渗透性差而不适合外用的蛋白质制剂提供了参考。

   爱丁娜运用全国首创专利生产技术为求美者打造高品质系列产品,实现居家护理也能达到医美的功效,既是对美丽的承诺,也是对美学的致敬。未来爱丁娜将不断追求卓越,为大众的美学事业奉献自己的力量。